Apunte

Pruebas Bioquimicas De La oxialasa : Sitocromo

C. Oxidasa

Materiales

Caja petric

Filtro de papel circular

Palillo Reactivo de kovags

Nota: Se realiza la prueba para verificar la enzima la oxidasa cio cromo manipulando los materiales del laboratorio como caja petric, pale filtro, palillo en las cuales se aplicara empatando el papel filtro con reactivo kovags para posteriormente tomar una azada con el asa bacteriológica de muestra problema la cual se encuentra en el tubo de ensaye con el medio de cultivo previamente elaborado y sembrado. Durante 30 seg se observara los cambios que se presentan en el papel filtro con el reactivo de kovags y la muestra problema aplicada.

Si la bacteria da positivo porque tienen un ciclo respiratorio oxidativo se considera positiva cuando toma un color purpura la muestra. Resultados que se observaran son positivos para seudomona e uroginosa y negativo para escherichie coli.

Prueba de La Katalaza

El objetivo de esta prueba es buscar la presencia de la enzima katalaza. El promixido de hidrogeno la bacteria por la azúcar por la vía oxidativa al ser este un compuesto muy oxidante las bacterias lo eliminan mediante la producción de la enzima katalaza (H2O2 – H2O mas 1-2DO2)

Procedimiento

Se le agrega unos 5 ml de perioxido de hidrogeno al 3% en un tubo de ensaye previamente estéril, vacio se toma la muestra con un asa bacteriológica con tubo problema y se deposita en el tubo con el reactivo, se observa la reacción y se anota la prueba se considera positiva si hay presencia de burbujas de oxigeno.

Resultados

Positiva para estafilococos aerus

Negativa para estreptococos

Practica 2

CBTis

No.155

Practica 2

Integrantes:

Flores Hernández Cynthia Giselle

Ramírez Barragán Brenda Berenice

Maestro: Alfaro López Víctor Manuel

Mesa: 3

Grupo: 4L2M

Introducción Solución que cuenta con los nutrientes necesarios para recuperar, multiplicar, aislar e identificar los microorganismos (bajo condiciones favorables de temperatura y pH), así como efectuar pruebas de susceptibilidad. Generalmente se presentan desecados en forma de polvo fino o granular antes de ser preparados, al prepararse podemos encontrarlos en estado sólido, semisólido y líquido. Este medio es un Medio diferencial para la detección, aislamiento y enumeración de bacterias coliformes y patógenos intestinales en aguas, productos lácteos y muestras biológicas. Objetivo En esta práctica realizamos el medio de Mac Conkey para 18 cajas este medio es para el crecimiento de enterobacterias del grupo mycobacterium en especial ese grupo es para repartir cada caja para cada integrante de las 6 mesas y tanto como ellos elaboraron medios para repartirlos como nosotros lo hicimos.

Materiales para medio de cultivo:

· Matraz Erlenmeyer 250ml

· Tubos de ensaye

· Vaso de precipitado 40ml

· Vidrio de reloj

· Varilla de cristal [agitador]

· Espátula

· Balanza granataria

• Materiales de apoyo: Utilizando técnica de esterilización autoclave, mechero de bunsen, torundas de algodón secas, papel secante color café, cinta masking tape y En reactivos: Medio de cultivo: “MAC CONKEY"

*Indicaciones para desarrollo del medio de cultivo MAC CONKEY: Pesar el polvo de medio de cultivo utilizando vidrio de reloj, realizando regla de tres, solicitar al laboratorio agua destilada [como apoyo] dependiendo de la cantidad de producto que se valla a ocupar en cajas petri, siendo un total de 18 cajas petri por mesa. Una vez pesado el polvo del medio de cultivo se mezclan en el contenido de agua que se tiene en el vaso de precipitado (360ml). Para poder mezclar y que no queden gránulos O grumos se utiliza la varilla de cristal para agitar conforme a las manecillas del reloj hasta que se disuelva el polvo en el agua. Una vez que ya tenemos la mezcla hecha dejamos reposar el producto de acuerdo a las indicaciones que contiene el depósito del medio de cultivo. Desarrollo Después del repaso del producto se le da movimientos en rotación a juego de muñeca exponiéndolo al fuego del mechero, estos movimientos y exposición darán como resultado la ebullición [hervor] y se le dará desde el momento que inicia la ebullición un minuto de tiempo para que quede listo nuestro medio de cultivo en forma liquida. Se debe tener cuidad con la ebullición del producto en el matraz erlenmeyer ya que este puede rebasar los limites y ocasionar accidente por quemaduras. Una ves terminado el proceso de ebullición del medio de cultivo se deja enfriar, se tamponea [se tapa] con torundas de algodón, se cubre con cinta masking tape, se etiqueta con registros del medio de cultivo, numero de masa, fecha y hora de elaboración. Todos los integrantes se pondrán de acuerdo para el proceso de esterilización y se depositaran en la autoclave: que ya previamente prepararon desde el inicio de la práctica.
**Técnica de esterilización de la autoclave [por calor húmedo]
Se esterilizara el producto a 15 libras de presión y una temperatura de 120*C durante 20 min. Una ves terminada la esterilización se deja enfriar el producto, se libera del autoclave, se entrega a las mesas se llevara a cabo el vaciado en cajas preti.
Para el vaciado en cajas petri, se requiere de un campo de esterilización en la mesa con 2 mecheros para que el producto este en el centro de la mesa dentro del campo de esterilización.

Concluciones:
Está parctica nos ayuda a saver como hacer ½ de cultivo para pruebas bioquimicas ( copro cultivo ) y saver desarrollar nuestro intelecto .

Imagenes

Practica 1

CBTis

No.155

Practica 1

Integrantes:

Flores Hernández Cynthia Giselle

Ramírez Barragán Brenda Berenice

Maestro: Alfaro López Víctor Manuel

Mesa: 3

Grupo: 4L2M

Introducción
Esta práctica sirve para realizar uno de los sistemas más importantes para la identificación de microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el medio de cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el cultivo. Las pruebas bioquímicas consisten en distintos test químicos aplicados a medios biológicos, los cuales, conocida su reacción, nos permiten identificar distintos microorganismos presentes. Su sistema de funcionamiento generalmente consiste en determinar la actividad de una vía metabólica a partir de un sustrato que se incorpora en un medio de cultivo y que la bacteria al crecer incorpora o no. Para realizar las pruebas bioquímicas se dispone de múltiples medios, los cuales se deben aplicar de acuerdo a las exigencias del microorganismo en estudio. De la amplia variedad de pruebas bioquímicas, nosotros en laboratorio utilizaremos 10, aplicados a 5 especies de microorganismos. Además estudiaremos los resultados que estos test arrojan, comparando resultados experimentales entre los distintos grupos de trabajo de nuestro laboratorio

Objetivo
Nuestro objetivo como equipo es realizar un medio de caldo de tetranionato utilizando tubos de ensaye experimentando o realizar pruebas febriles no solo hicimos de ese medio si no también de agar nutritivo pero realmente eso medios son para pruebas febriles esos medios son para el crecimiento de enterobacterias y para la salmonella

Materiales para medio de cultivo:

· Matraz Erlenmeyer 250ml

· Vaso de precipitado 50ml

· Vidrio de reloj

· Varilla de cristal [agitador]

· Tubos de ensaye

· Espátula

· Balanza granataria

• Materiales de apoyo: Utilizando técnica de esterilización autoclave, mechero de bunsen, torundas de algodón secas, papel secante color café, cinta masking tape , papel blanco para cubrir mesa, y En reactivos: Medio de cultivo: “caldo nutritivo” y “caldo de tetrationato”

Indicaciones para desarrollo del medio de cultivo “Caldo de Tetrationato”

Pesar el polvo de medio de cultivo utilizando vidrio de reloj, realizando regla de tres, solicitar al laboratorio agua destilada, dependiendo de la cantidad de producto que se valla a ocupar en tubos de ensaye, siendo un total de 6 tubos por mesa.
Una vez pesado el polvo del medio de cultivo se mezclan en el contenido de agua que se tiene en el matraz erlenmeyer.
Para poder mezclar y que no queden gránulos
O grumos se utiliza la varilla de cristal para agitar conforme a las manecillas del reloj hasta que se disuelva el polvo en el agua.

Una vez que ya tenemos la mezcla hecha dejamos reposar el producto de acuerdo a las indicaciones que contiene el depósito del medio de cultivo.

Indicaciones para desarrollo del medio de cultivo “Caldo Nutritivo”

Pesar el polvo de medio de cultivo utilizando vidrio de reloj, realizando regla de tres, solicitar al laboratorio agua destilada (60ml), [dependiendo de la cantidad de producto que se valla a ocupar en tubos de ensaye], siendo un total de 6 tubos por mesa.
Una vez pesado el polvo del medio de cultivo se mezclan en el contenido de agua que se tiene en el matraz erlenmeyer.
Para poder mezclar y que no queden gránulos
O grumos se utiliza la varilla de cristal para agitar conforme a las manecillas del reloj hasta que se disuelva el polvo en el agua.
Una vez que ya tenemos la mezcla hecha dejamos reposar el producto de acuerdo a las indicaciones que contiene el depósito del medio de cultivo.

Desarrollo
Después del repaso del producto se le da movimientos en rotación a juego de muñeca exponiéndolo al fuego del mechero, estos movimientos y exposición darán como resultado la ebullición [hervor] y se le dará desde el momento que inicia la ebullición un minuto de tiempo para que quede listo nuestro medio de cultivo en forma liquida.
Se debe tener cuidad con la ebullición del producto en el matraz erlenmeyer ya que este puede rebasar los limites y ocasionar accidente por quemaduras.
Una ves terminado el proceso de ebullición del medio de cultivo se deja enfriar, se tamponea [se tapa] con torundas de algodón, NO se esteriliza y se deja reposando hasta que estén ya esterilizados los tubos de ensaye, para vaciar el medio. Ya listos los tubos se vacía el medio en cada uno de ellos (10ml cada uno) ya terminado el vaciado se tamponean con torundas de algodón, se etiquetan y se entregan al maestro.

Después del reposo del producto se le da movimientos en rotación a juego de muñeca exponiéndolo al fuego del mechero, estos movimientos y exposición darán como resultado la ebullición [hervor] y se le dará desde el momento que inicia la ebullición un minuto de tiempo para que quede listo nuestro medio de cultivo en forma liquida.
Se debe tener cuidad con la ebullición del producto en el matraz erlenmeyer ya que este puede rebasar los limites y ocasionar accidente por quemaduras.
Una ves terminado el proceso de ebullición del medio de cultivo se deja enfriar, se tamponea [se tapa] con torundas de algodón, se cubre con cinta masking tape, se etiqueta con registros del medio de cultivo, numero de masa, fecha y hora de elaboración.
Todos los integrantes se pondrán de acuerdo para el proceso de esterilización y se depositaran en la autoclave. Una vez ya esterilizado, se deja enfriar y se vacía en tubos de ensaye No estériles, se tamponea, se etiquetan y se entregan al maestro.

**Técnica de esterilización de la autoclave [por calor húmedo]
Se esterilizara el producto a 15 libras de presión y una temperatura de 120*C durante 20 min. Una ves terminada la esterilización se deja enfriar el producto, se libera del autoclave, se entrega a las mesas se llevara a cabo el vaciado en cajas preti.
Para el vaciado en cajas petri, se requiere de un campo de esterilización en la mesa con 2 mecheros para que el producto este en el centro de la mesa dentro del campo de esterilización.

Concluciones:
Está parctica nos ayuda a saver como hacer ½ de cultivo para pruebas bioquimicas ( copro cultivo ) y saver desarrollar nuestro intelecto .

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